产品货号:
GS1467
中文名称:
淀粉树脂
英文名称:
Amylose Resin
产品规格:
1mL|5mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是一种亲和基质,用来分离与麦芽糖结合蛋白融合的目的蛋白,与MBP融合蛋白有高度特异性结合,可实现一步洗脱,方便快捷。适用于重力型过柱,MBP标签可通过Xa因子蛋白酶或TEV蛋白酶轻松去除。
每毫升柱床体积可结合>4mg MBP5-paramyosin sal融合蛋白。
组分 | 1mL | 5mL |
淀粉树脂 | 1mL | 5mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:2~8℃,切勿冻存,树脂保存在20%乙醇溶液中。
过柱缓冲液:20mM Tris-HCl(pH7.4),0.2M NaCl。
注:
① 根据目的蛋白的稳定性可选择性添加:1mM EDTA,1mM DTT或10mM 2-巯基乙醇等。
② 可以尝试使用HEPES,MOPS和磷酸盐缓冲液(pH值从7.0~8.5)代替了柱缓冲液中的Tris-HCl,结果相似。
③ NaCl或KCl浓度在25mM至1M之间也与亲和纯化兼容。
- 取适量填料进行装柱,流净保护液,用5倍柱体积的过柱缓冲液洗涤平衡柱料以备用。
- 在4℃条件下,将可表达MBP5-paramyosin Sal融合蛋白的重组大肠杆菌中所得到的蛋白粗提取物,上样流经1mL的淀粉树脂柱。
- 用10倍柱体积的过柱缓冲液清洗柱子,收集未与柱料结合的杂蛋白以便后续电泳分析。
- 后再向过柱缓冲液中加入10mM的麦芽糖混匀后洗脱目的蛋白,在4~20%的SDS-PAGE电泳胶上检测,理论应显示一个条带则是所需的目的蛋白。
装柱的树脂可以用以下步骤进行再生:
成分 | 用量 |
水 | 3倍柱体积 |
0.1%SDS | 3倍柱体积 |
水 | 1倍柱体积 |
过柱缓冲液 | 5倍柱体积 |
建议最大线性流速:24cm/h
直径1.6cm柱子:0.8mL/min
直径2.5cm柱子:2.0mL/min
线性流速(cm/h)πr2=体积流速mL/h
- 每次使用前要用5倍体积的过柱缓冲液冲洗平衡柱子。
- 尽管树脂柱需要在4℃下过洗,但是0.1%的SDS在这个温度将会形成沉淀,因此建议用前将SDS溶液储存在室温。本品可进行多至5次以上的再生程序。
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